如何將多(duo)肽溶解在DMSO中？

二甲基亞砜（DMSO）是一種含硫(liu)有機化合物，分子式(shi)為（CH3)2SO，常溫下為無色無臭的透明液體。DMSO作(zuo)為冷凍保護劑經常應(ying)用于細胞庫(ku)。在細胞冷凍過(guo)程(cheng)中(zhong)，DMSO可防止胞內/胞外晶體的形成(cheng)，其工作(zuo)濃度為10%。DMSO通(tong)常可與鹽或血清白(bai)蛋白(bai)結合。

疏(shu)水性(xing)多(duo)肽可(ke)(ke)以(yi)很(hen)容(rong)易地溶(rong)解(jie)在DMSO中。但DMSO可(ke)(ke)增(zeng)加(jia)細胞(bao)的(de)通透性(xing)，若(ruo)多(duo)肽溶(rong)解(jie)于DMSO中則會對細胞(bao)產生毒(du)性(xing)作用。高濃度(du)的(de)DMSO絕不(bu)可(ke)(ke)應(ying)用于細胞(bao)培(pei)養中。濃度(du)為5%的(de)DMSO即(ji)可(ke)(ke)讓細胞(bao)膜溶(rong)解(jie)。大多(duo)數細胞(bao)株可(ke)(ke)以(yi)容(rong)忍(ren)0.5% DMSO，少許可(ke)(ke)以(yi)容(rong)忍(ren)1%的(de)濃度(du)，而不(bu)表現出(chu)嚴重的(de)細胞(bao)毒(du)性(xing)。然而原代細胞(bao)培(pei)養對其更敏感。所以(yi)如果是(shi)用原代細胞(bao)做劑量/反應(ying)曲線(可(ke)(ke)行性(xing))，其濃度(du)應(ying)低于0.1%。

對于某些疏水性(xing)非常高(gao)的(de)多肽，可先嘗試將(jiang)其(qi)溶解在少量的(de)DMSO(30-50ul,100%)中(zhong)，然后慢慢 (一滴一滴地)將(jiang)其(qi)添加到不斷攪拌的(de)水溶液(ye)如PBS或其(qi)他想要的(de)緩沖液(ye)中(zhong)，直至理想濃度。如果滴加過程中(zhong)，肽溶液(ye)開始變渾濁，說明已經達到了溶解極限。另外，超聲波有(you)助(zhu)于多肽溶解。

經驗:

對幾乎所有的細胞來說，濃度為0.1%DMSO是**的。

廣(guang)泛被(bei)用于(yu)細胞培養的DMSO終濃度為0.5%，不(bu)會引(yin)起細胞毒性(xing)。

雖(sui)然對部(bu)份細胞(bao)來說，1%DMSO也(ye)不會產生(sheng)細胞(bao)毒性，但我們推薦0.5%。

也有(you)5%DMSO成(cheng)功地應用于某些細胞(bao)的案例。

始(shi)終保持終濃度在(zai)0.5%，但儲存時可200倍高(gao)濃度溶于100%的DMSO中。