一、質譜(pu)MS
這里所(suo)說的(de)質(zhi)譜(pu)指的(de)是**質(zhi)譜(pu)，多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)質(zhi)譜(pu)鑒定(ding)(ding)指的(de)就(jiu)是利用質(zhi)譜(pu)法對多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)進行(xing)(xing)鑒定(ding)(ding)。多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)質(zhi)譜(pu)鑒定(ding)(ding)主要是鑒定(ding)(ding)多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)的(de)**結構(gou)，通過檢測多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)的(de)氨基酸序列(lie)信息獲(huo)取多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)的(de)序列(lie)或翻(fan)譯后(hou)(hou)(hou)修(xiu)飾(shi)信息。多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)鑒定(ding)(ding)常用串聯(lian)質(zhi)譜(pu)進行(xing)(xing)。從代測樣品(pin)中提取出多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)以后(hou)(hou)(hou)，先用色譜(pu)法分離(li)(li)(li)，然后(hou)(hou)(hou)離(li)(li)(li)子源將分離(li)(li)(li)后(hou)(hou)(hou)的(de)多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)進行(xing)(xing)離(li)(li)(li)子化，之后(hou)(hou)(hou)**質(zhi)譜(pu)檢測完整多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)離(li)(li)(li)子的(de)質(zhi)荷(he)比，合(he)(he)肥合(he)(he)生生物科(ke)技(ji)提供(gong)基于質(zhi)譜(pu)的(de)多(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)鑒定(ding)(ding)服務。
二、高效(xiao)液(ye)相色譜 ( HPLC)
在適(shi)宜的(de)(de)色(se)譜(pu)條件下應(ying)用 HPLC可以(yi)在短時間內完成對蛋(dan)白質(zhi)、多肽(tai)的(de)(de)分離(li)(li), 更(geng)重要的(de)(de)是(shi) HPLC能在制備規 模(mo)上(shang)生產具有生物活性(xing)(xing)的(de)(de)多肽(tai)。在多肽(tai)的(de)(de)分離(li)(li)、純化和鑒定中應(ying)用*多的(de)(de)是(shi)反(fan)相高(gao)效液相色(se)譜(pu) (RP-HPLC)，約95%是(shi)C18反(fan)相硅膠(jiao)HPLC。其原理(li)是(shi)基于多肽(tai)的(de)(de)疏水性(xing)(xing)，在不(bu)同介質(zhi)條件下，使不(bu)同的(de)(de)多肽(tai)得以(yi)分離(li)(li)，具有快速、高(gao)效和高(gao)回收的(de)(de)特點(dian)，在分離(li)(li)和制備多肽(tai)及蛋(dan)白質(zhi)上(shang)有獨特的(de)(de)優越性(xing)(xing)。
合(he)肥(fei)合(he)生生物整個(ge)工藝中(zhong)會(hui)有三(san)次(ci)(ci)(ci)HPLC確認(ren)，切割之后(hou)(hou)會(hui)進行MS和HPLC分析，制備(bei)之后(hou)(hou)會(hui)再次(ci)(ci)(ci)檢(jian)(jian)測HPLC交付QC檢(jian)(jian)測中(zhong)心(xin)，經過(guo)再次(ci)(ci)(ci)MS確認(ren)后(hou)(hou)凍干，凍干之后(hou)(hou)，在發貨之前會(hui)進行*后(hou)(hou)一次(ci)(ci)(ci)檢(jian)(jian)測，并(bing)提供檢(jian)(jian)測報告，如下：
三、液質聯用(yong)LC-MS
液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)質(zhi)(zhi)譜(pu)(pu)(pu)(pu)聯用技術（liquid Chromatograph Mass Spectrometer），簡(jian)稱(cheng)LC-MS，它以液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)作為分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)離(li)系(xi)統(tong)，質(zhi)(zhi)譜(pu)(pu)(pu)(pu)為檢(jian)測系(xi)統(tong)，樣品(pin)在(zai)質(zhi)(zhi)譜(pu)(pu)(pu)(pu)部分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)和(he)流動相(xiang)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)離(li)，被離(li)子化后，經質(zhi)(zhi)譜(pu)(pu)(pu)(pu)的(de)(de)(de)質(zhi)(zhi)量(liang)(liang)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)析器(qi)將離(li)子碎(sui)片(pian)按(an)質(zhi)(zhi)量(liang)(liang)數分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)開(kai)，經檢(jian)測器(qi)得到(dao)質(zhi)(zhi)譜(pu)(pu)(pu)(pu)圖。液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)（LC）能夠(gou)(gou)有(you)效的(de)(de)(de)將有(you)機物(wu)待測樣品(pin)中(zhong)的(de)(de)(de)有(you)機物(wu)成分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)離(li)開(kai)，而質(zhi)(zhi)譜(pu)(pu)(pu)(pu)（MS）能夠(gou)(gou)對(dui)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)開(kai)的(de)(de)(de)有(you)機物(wu)逐個的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)析，得到(dao)有(you)機物(wu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)子量(liang)(liang)，結構(gou)（在(zai)某些情況(kuang)下）和(he)濃度（定量(liang)(liang)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)析）的(de)(de)(de)信息。強大(da)的(de)(de)(de)電(dian)噴霧電(dian)離(li)技術造就了(le)LC-MS質(zhi)(zhi)譜(pu)(pu)(pu)(pu)圖十分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)簡(jian)潔，后期數據(ju)處理簡(jian)單的(de)(de)(de)特點。LC-MS是有(you)機物(wu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)析實驗(yan)室，藥物(wu)、食(shi)品(pin)檢(jian)驗(yan)室，生產過程控制、質(zhi)(zhi)檢(jian)等部門必不(bu)可少的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)析工(gong)具
四、核磁C\H譜
合(he)肥合(he)生(sheng)生(sheng)物(wu)提供多肽核磁1H NMR和13C NMR譜(pu)圖，是(shi)*重要的(de)(de)參數之(zhi)一，它可(ke)以提供磁性(xing)核的(de)(de)類型信息(xi)，既包括磁性(xing)核電子結構信息(xi)，也包括磁性(xing)核中(zhong)成鍵(jian)狀態的(de)(de)信息(xi)。通(tong)過化學(xue)位移可(ke)以直接判別氫(qing)譜(pu)中(zhong)甲基氫(qing)、芳(fang)氫(qing)、烯氫(qing)和醛(quan)氫(qing)等等。通(tong)過化學(xue)位移，尤(you)其是(shi)C化學(xue)位移可(ke)以推導出有機化合(he)物(wu)的(de)(de)基本骨架和結構。
五(wu)、MALDI-TOF
譜分析(xi)**步是把待(dai)分析(xi)的(de)物質(zhi)離(li)子(zi)化，然而對于多(duo)肽的(de)大分子(zi)物質(zhi)，例(li)如ESI在(zai)電離(li)過程中(zhong)會使大分子(zi)離(li)子(zi)發生碎裂形成碎片。所以MALDI-TOF很好的(de)解(jie)決這個(ge)問題，它(ta)(ta)通(tong)過引用(yong)基質(zhi)分子(zi)，不產(chan)生或者較少產(chan)生離(li)子(zi)碎片，它(ta)(ta)能更準確的(de)測定多(duo)肽大分子(zi)物質(zhi)。
其(qi)原理(li)：當用一定強度(du)的激光照射樣(yang)品(pin)與基質形成的共結晶薄膜，基質從激光中吸收能量，基質與樣(yang)品(pin)之(zhi)間發生電荷轉移使(shi)得樣(yang)品(pin)分子電離。它是一種軟電離技術。
六、肽含量檢測（元素分析）
多肽(tai)含量則(ze)是指目(mu)標多肽(tai)在產品中的凈含量，一(yi)般以(yi)N元(yuan)素分(fen)析或氨基(ji)酸分(fen)子的方法來檢測。
七、二級(ji)質譜測序LC-MS/MS
蛋白(bai)(bai)(bai)先(xian)經胰蛋白(bai)(bai)(bai)酶消化成(cheng)肽(tai)段(duan)，肽(tai)段(duan)在質(zhi)譜儀中(zhong)離子化后，會帶上一(yi)定量的(de)(de)電荷(he)(he)，通過檢測器分(fen)析(xi)(xi)，可(ke)得(de)到(dao)各(ge)肽(tai)段(duan)的(de)(de)質(zhi)荷(he)(he)比（m/z），即**質(zhi)譜圖(tu)；為獲(huo)得(de)肽(tai)段(duan)更詳細的(de)(de)序列(lie)信息，部份肽(tai)段(duan)再次(ci)被破碎和分(fen)析(xi)(xi)，產(chan)生二級(ji)質(zhi)譜圖(tu)。*后采用(yong)質(zhi)譜檢索軟件選(xuan)擇相應的(de)(de)蛋白(bai)(bai)(bai)數據(ju)庫，對獲(huo)得(de)的(de)(de)全(quan)部質(zhi)譜數據(ju)進行(xing)分(fen)析(xi)(xi)，同時以打分(fen)的(de)(de)形式將鑒定到(dao)的(de)(de)蛋白(bai)(bai)(bai)依(yi)次(ci)排列(lie)。
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